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實時熒光定量PCR儀工作原理解析
更新時間:2018-03-27   點擊次數:6199次

實時熒光定量PCR儀工作原理解析

實時熒光定量PCR儀廣泛應用于各級各類醫療機構、大學及研究所、CDC、檢驗檢疫局、獸醫站、食品企業及乳品廠等。實時熒光定量pcr儀由熒光定量系統和計算機組成,用來監測循環過程的熒光。與實時設備相連的計算機收集熒光數據。數據通過開發的實時分析軟件以圖表的形式顯示。原始數據被繪制成熒光強度相對于循環數的圖表。原始數據收集后可以開始分析。實時設備的軟件能使收集到的數據進行正?;幚韥韽浹a背景熒光的差異。正常化后可以設定域值水平,這就是分析熒光數據的水平。

實時熒光定量Pcr儀主要工作原理:

標記有熒光素的Taqman探針與模板DNA混合后,完成高溫變性,低溫復性,適溫延伸的熱循環,并遵守聚合酶鏈反應規律,與模板DNA互補配對的Taqman探針被切斷,熒光素游離于反應體系中,在特定光激發下發出熒光,隨著循環次數的增加,被擴增的目的基因片段呈指數規律增長,通過實時檢測與之對應的隨擴增而變化熒光信號強度,求得CT值,同時利用數個已知模板濃度的標準品作對照,即可得出待測標本目的基因的拷貝數。

工作原理解析圖:

實時熒光定量PCR儀工作原理解析圖

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